本文为Qumi系列设备合作产出第一篇顶刊成果,利用Qumi-2000单光子共聚焦显微镜完成NIRII长波发光光谱、荧光寿命表征与活体在体成像,相关工作发表于Advanced Functional Materials。
NIRIIb(15001700 nm)生物窗口凭借组织散射更低、穿透深度更深、自发荧光背景微弱的优势,是活体无创成像的理想波段。但镧系稀土纳米晶探针长期存在两大痛点:敏化染料聚集淬灭(ACQ)、溶剂诱导淬灭,造成发光量子产率偏低;同时,如何把成像示踪和核酸药物递送结合,实现治疗过程的原位可视化监测,一直是骨损伤修复领域的难题。
近期,同济大学附属口腔医学院康非吾教授团队、上海科技大学朱幸俊研究员团队通过共沉淀辅助敏化剂组装策略,将镧系纳米材料的NIR-IIb相对量子产率提升至5.94%,同时作为siRNA递送载体,实现小鼠骨缺损模型中监测核酸药物递送与胞内释放。本工作的长波发光光谱、荧光寿命、离体与活体NIRIIb显微测量,依托Qumi系列单光子共聚焦显微镜备完成。
01 材料创新:共沉淀CaP壳层,破解染料敏化淬灭难题
NIR-IIb覆盖1500–1700 nm波段,较低的组织散射有利于深部成像。但镧系纳米材料吸光能力有限,表面缺陷和周围分子振动还会消耗激发能量。引入有机染料虽可增强吸光,染料聚集及溶剂诱导猝灭又会限制发光效率。
团队将IR-806染料与磷酸钙共同沉淀,在含铥纳米晶表面形成复合壳层,构建CaP-Assembly。这层结构减少纳米晶的非辐射能量损失,同时抑制染料聚集与溶剂诱导猝灭。
在808 nm激发下,其NIR-IIb相对量子产率达到5.94%,对照TmNP为0.27%,仅组装IR-806的TmNP@IR-806为2.10%。1630 nm发光寿命由TmNP的0.70 ms延长至1.15 ms,为能量损失受到抑制提供了实验依据。

图1:CaPAssembly中共沉淀辅助敏化实现NIRIIb发光增强
02 功能升级:成像示踪 + RNAi 药物递送二合一
CaP壳层不止是发光探针,同时是核酸药物载体:
装载HIF-1α siRNA之后,纳米颗粒进入巨噬细胞,壳层降解并释放药物,促进巨噬细胞向促修复M2表型极化;
同步释放HIF1α siRNA,沉默靶基因,抑制破骨细胞过度活化,改善骨缺损部位缺氧炎症微环境,协同促进成骨分化。
巧妙的比率成像设计:
808 nm激发:信号来自IR806染料敏化发光,CaP壳降解之后染料流失,信号发生衰减;
980 nm激发:信号来自Tm³⁺本征发光,不受壳层降解影响,作为内参基准。
研究团队利用两种激发条件下的发光比值,监测载体降解与释放过程。在小鼠胫骨缺损模型中,材料在注射后约3小时快速积累于骨髓区域,随后比值信号下降。结合细胞实验和骨组织评价,负载siRNA的体系表现出抑制破骨细胞分化、促进骨修复的作用。

图 2:活体NIR‑IIb窗口下CaP‑Assembly:HIF‑1αsiRNA生物成像
03 Qumi系列:面向NIR‑IIb/IIc 前沿生物材料的探测底座
这是Qumi系列设备产出的第一篇顶刊合作论文。镧系稀土纳米晶、量子点等新型长波荧光探针,发光往往处于15002000 nm区间,发光强度弱、寿命多处于百微秒毫秒量级,对探测系统提出严苛要求。传统InGaAs、PMT很难同时满足以上全部条件。Qumi系列依托自研超导单光子探测技术,可以对外提供:
NIRIIb/NIRIIc 波段共聚焦荧光成像;
弱光稳态光谱测试;
荧光寿命(PL lifetime)时间分辨测量;
比率成像、多通道光子计数等定制化实验支撑。
我们的上海Qumi Demo实验室已经对外开放,不管是稀土纳米晶、量子点、新型长波有机染料,都可以来上机实测、方案预研,利用量子极限探测能力赋能材料与生命科学交叉研究。

图3:包含皮质骨与骨髓的胫骨切片显微 NIR‑IIb 发光成像
责任编辑:kj005
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