mRNA理论上可以表达任何蛋白质,被称为“万能钥匙”,因此mRNA技术在生物制药领域极具潜力和热度。在mRNA生产流程中,通过体外转录(In VitroTranscription,IVT)以线性DNA为模板来制备mRNA,是mRNA工艺中的重要一环。体外转录合成(IVT)的过程需要多个酶和核苷酸等物质的参与,是一个较为复杂的酶催化反应,为了保证IVT的工艺稳定,通常需要根据工艺的规模设计不同反应体系以达到最优条件来实现产能的稳步提升。
相关研究发现,通过不同类型的修饰核苷酸替换和适当的镁离子浓度,能抑制dsRNA的合成[1],镁、钠离子,游离核苷酸NTPs以及不同类型的离子对于IVT反应saRNA产量也有一定的影响[2]。另外,离子类型对于IVT反应产量具有非常重要的作用[3]。
因此,为了获得更优的IVT反应体系,翌圣生物摸索了多种反应条件和体系,来提升IVT产物性能,不仅可以一定程度地提高产量,同时降低dsRNA的产生以及提高RNA的完整度。翌圣生物现推出全新10×Transcription Buffer,同时搭配性能优越的Tris盐型核苷酸产品,助力mRNA药物快速开发。
参考资料:
Triana-Alonso,F.J., Dabrowski,M., Wadzack,J. and Nierhaus,K.H. (1995) Self-coded 3'-extension of run-off transcripts produces aberrant products during in vitro transcription with T7 RNA polymerase. J. Biol. Chem., 270, 6298–6307
Konarska,M.M. and Sharp,P.A. (1989) Replication of RNA by the DNA-dependent RNA polymerase of phage T7. Cell, 57, 423–431.
[3]Samnuan K , Blakney A K , Mckay P F , et al. Design-of-Experiments In Vitro Transcription Yield Optimization of Self-Amplifying RNA. 2021.
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